宫颈癌是威胁全球女性健康的主要恶性肿瘤，其高发病率和死亡率始终是公共卫生领域的一大难题。2022年全球新发宫颈癌病例约66万例，死亡病例达35万例，其中高危型HPV16和18型是引发超70%宫颈癌病例的主要诱因。尽管HPV疫苗接种和癌症筛查已逐步普及，但发展中国家的疾病负担依旧沉重，临床中化疗耐药的问题更是让众多患者面临治疗困境，研发新的治疗手段迫在眉睫。而高效、易操作的临床前研究模型，正是推动宫颈癌基础研究和新疗法开发的关键。

近日，在Life刊发的一项最新研究为宫颈癌研究带来了全新的实验模型方案，研究团队通过优化鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）实验体系，成功搭建出一套低成本、周期短、技术门槛低的体内研究平台，为宫颈癌研究的开展提供了新的实用路径。

传统宫颈癌临床前研究模型如小鼠异种移植、患者来源类器官等，虽能较好还原肿瘤的生物学特征，为研究提供可靠的实验依据，但这类模型普遍存在实验周期长、成本高昂、对实验设施和操作要求严苛等问题，让不少实验室难以开展相关研究。而鸡胚CAM作为鸡胚特有的无神经、高血管化胚外结构，天然具备免疫抑制特性，是异种移植肿瘤生长的理想载体，同时还拥有实验周期短、成本低、技术易操作的优势。但此前针对宫颈癌肿瘤诱导的CAM实验，缺乏标准化的方法优化，相关技术变量的研究也较为有限，本次研究则针对性解决了这一行业痛点，通过系列实验确定了宫颈癌肿瘤诱导的最优条件，实现了肿瘤的高效诱导。

研究团队采用3×10^6个HeLa和SiHa宫颈癌细胞系进行接种，系统探究了接种时间、CAM处理方式、基质胶使用等关键变量对肿瘤诱导的影响。结果显示，鸡胚孵化第7天接种的胚胎存活率显著更高，HeLa细胞接种后胚胎存活率达62%，SiHa细胞达68%，而第4天接种因胚胎过于脆弱，存活率大幅降低；对CAM进行轻微划伤可显著提升肿瘤形成率，划伤后HeLa、SiHa细胞的肿瘤形成率分别为46%、43%，未划伤组仅为12%、10%；基质胶是肿瘤形成的关键条件，无基质胶会导致细胞分散，难以形成肿瘤，而胰酶处理对肿瘤形成无显著影响。

图1. 利于肿瘤生成的实验条件

该模型的一大突出优势是肿瘤形成速度快，宫颈癌细胞接种到CAM后，3-4天即可检测到肿瘤生长，且肿瘤直接暴露于CAM表面，便于研究人员直接观察、操作和拍照记录。对肿瘤大小的检测显示，HeLa细胞诱导的肿瘤长轴均值为5.99±0.25mm，SiHa细胞诱导的肿瘤长轴均值为7.20±0.86mm，二者无明显统计学差异。

图2. 卵内肿瘤的生成情况

组织学染色分析进一步证实，CAM诱导的宫颈癌肿瘤具备完整的组织架构，且形成了明显的血管样结构，HeLa和SiHa细胞来源的肿瘤中，均能清晰观察到含有红细胞的管腔样结构。这一结果表明，CAM能为肿瘤生长提供充足的血管化微环境，满足肿瘤短期生长的营养需求，也让该模型适用于宫颈癌血管生成相关的研究方向。

图3. CAM上诱导的肿瘤组织学分析

肿瘤增殖活性的检测结果同样印证了该模型的有效性，免疫荧光检测显示，HeLa和SiHa细胞诱导的肿瘤均呈Ki-67阳性表达，其中HeLa来源肿瘤Ki-67平均荧光强度为27.0±7.11，SiHa来源肿瘤为27.6±12.6，二者无统计学差异。这说明该模型中诱导的肿瘤保留了宫颈癌肿瘤的核心增殖特征，能为宫颈癌增殖相关研究提供可靠的实验依据。

图4. 卵内诱导肿瘤的Ki-67表达分析

此外，研究团队还梳理出了标准化的鸡胚CAM模型宫颈癌肿瘤诱导流程，从鸡胚的消毒、孵化，到第6天开窗暴露CAM，第7天划伤CAM并接种细胞，再到后续的静态培养，直至第14天获取肿瘤进行分析，形成了一套可复现、易操作的完整实验方案，为后续相关研究的开展提供了清晰、具体的技术参考。

图5. 利用HeLa和SiHa细胞系进行卵内肿瘤诱导的整体流程

宫颈癌研究的推进，离不开多元化、可及性高的实验模型支撑，尤其是对于缺乏专业动物实验设施的实验室而言，低成本、易操作的模型能有效降低研究门槛，让更多研究人员参与到宫颈癌研究中。本次研究优化的鸡胚CAM宫颈癌肿瘤诱导模型，填补了该模型在宫颈癌研究中标准化方法的空白，实现了肿瘤的快速、高效诱导，且诱导出的肿瘤完整保留了血管化、增殖活性等宫颈癌的核心生物学特征。

这一模型的成功优化，不仅为宫颈癌的肿瘤发生、血管生成等基础生物学研究提供了实用的体内研究平台，也为宫颈癌新治疗分子的临床前初步筛选奠定了坚实基础，能有效缩短研究周期、降低研究成本，加速宫颈癌新疗法的研发进程。同时，该模型的易操作性让更多实验室能够开展宫颈癌的体内研究，进一步推动宫颈癌研究的普及与深入，为最终攻克这一威胁女性健康的难题增添了新的助力，也为其他癌症的研究模型开发提供了有益的参考思路。（生物谷Bioon.com）

参考文献：

Patiño-Morales CC, Jaime-Cruz R, González-Pérez R, Villavicencio-Guzmán L, Ramírez-Fuentes TC, Salazar-García M. The Chick Embryo Chorioallantoic Membrane Assay as a Short-Term Exploratory Model for Cervical Cancer Research.Life (Basel). 2026;16(1):135. Published 2026 Jan 15. doi:10.3390/life16010135